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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | E0021 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | B細胞;EBV轉(zhuǎn)染;女性 |
細胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 懸浮 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
帛科細胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細胞培養(yǎng)板、細胞反應(yīng)管、搖瓶、細胞培養(yǎng)瓶、細胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
HMy2.CIR細胞 | 1×106 | E0021 |
產(chǎn)品簡稱:HMy2.CIR細胞
中文名稱:人B淋巴母細胞
規(guī)格:1×106
種屬:人
來源:B細胞;EBV轉(zhuǎn)染;女性
培養(yǎng)基:IMDM
狀態(tài):懸浮
單位:T25/瓶
貨號:E0021
帛科細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用(如單克隆細胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細胞實驗用(一般性的傳代,保存細胞,為實驗提供細胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng),還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項:
1.細胞復(fù)蘇
將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%(過量不足,過晚細胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細胞一代,即從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間,非細胞有絲分裂次數(shù))時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度)進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數(shù),然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細胞凍存
當(dāng)細胞密度達到80%~90%時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護細胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個月。
細胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導(dǎo)致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細胞死亡。
注意事項:
HMy2.CIR細胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點燃酒精燈:注意火焰不能太小;
(5)嚴(yán)格的無菌操作;
(6)貼壁細胞消化適度:消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作,每種細胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品:
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小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISAKit Nandrolone decanoate 中文名:癸酸諾龍 分子式:C28H44O3 度:98.0%
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小鼠載脂蛋白B 英文名稱: Mouse Apolipoprotein B 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Apo-B Esomeprazole 161796-78-7 中文名:埃索美拉唑鈉 分子式:C17H19N3NaO3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
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葉綠醇 HPLC≥98% 20mg 英文名稱MouseIL-1sRⅡELISAkit小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)規(guī)格:96T/48T
葉酸 HPLC≥98% 100mg 冰凍切片組織ANDROGEECEPTOR蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20
一葉萩堿 HPLC≥98% 20mg Ratc-junELISA試劑盒大鼠c-junELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
一枝蒿甲素 HPLC≥98% 20mg 小鼠樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒 ,英文名: IGFBP-2 ELISA Kit
伊立替康 HPLC≥98% 20mg 小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA檢測試劑盒MouseAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit 96T/48T
依洛替康 HPLC≥98% 20mg 人甲狀腺素抗體(TAb)試劑盒 Human Thyroid Aibody,TAb ELISA Kit
依帕司他 HPLC≥98% 20mg RatAzidothymidine,AZTELISAKit大鼠疊氮胸苷(AZT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
NCI-H460 人大細胞細胞N,O-雙(三甲硅基)乙酰胺(>75.0%(GC))N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide質(zhì)量規(guī)格:>75.0%(GC)
COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細胞巴氯芬(標(biāo)準(zhǔn)品)Baclofen質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人臍帶血單個核細胞巴洛沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)Balofloxacin Dihydrate質(zhì)量規(guī)格:> 98%,水合物標(biāo)準(zhǔn)品
人胚腎細胞;2V6.11 人胰腺上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL巴洛沙星Balofloxacin Dihydrate質(zhì)量規(guī)格:度> 98.5%,BR,二水合物
人肝細胞;HL-7702[L-02]鹽酸苯達莫司汀Bendamustine HCl質(zhì)量規(guī)格:度> 98%
HMy2.CIR細胞人真皮成纖維細胞-RNAHEF-a miRNA5 μg乳酸鈣五水(>98%,USP)質(zhì)量規(guī)格:>98%,USPCalcium (L)-lactate, pentahydrate
Hela細胞,細胞 耐DDP細胞,A549/DDP細胞 H9c2大鼠心肌細胞(ATCC來源)2'-脫氧胸苷-5'-一1酸二鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>97%,分子生物學(xué)級dTMP, 2'-Deoxythymidine-5'-monophosphate di salt
豚鼠心肌細胞;GP-H1衛(wèi)茅醇(>99%,分子生物學(xué)級)質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級Dulcitol
CLMP Others Human 人 ASAM 人細胞裂解液 (陽性對照) 阿尼芬凈質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRAnidulafungin
CL-0419QSG-7701(人正常肝細胞)5×106cells/瓶×2安絲菌素P-3(束絲放線菌)質(zhì)量規(guī)格:總含量>95% ,進分Ansamitocin P-3